Thérapie photodynamique, Triphosphate, Photosensibilisateurs, Aptamère, Oligonucleotide, DNA, Ruthenium, Enzyme, SELEX, Chimie, Biochimie

L'objectif principal de cette thèse est de développer des triphosphates modifiés à l'aide de techniques de chimie click et d'autres méthodes de bioconjugaison, en les associant à des photosensibilisateurs, principalement des complexes de ruthénium polypyridyl, en vue de leur application dans des protocoles Mod-SELEX pour l'identification d'aptamères modifiés contre diverses cibles. L'accent a été mis sur les complexes polypyridyl ruthénium, bien que d'autres photosensibilisateurs aient également été explorés, en vue d'une application dans les thérapies photodynamiques ciblées pour le cancer du côlon. Nous avons synthétisé des triphosphates modifiés, en créant un lien covalent entre le photosensibilisateur et le 5-Ethynyl-2'-déoxyuridine 5'-triphosphate, un analogue de l'uridine triphosphate. Nous avons ensuite évalué la capacité de ces triphosphates modifiés à servir de substrats dans des réactions enzymatiques, et plus particulièrement leur incorporation par des polymérases dans des brins d'ADN via des réactions d'extension d'amorces ou de PCR. L'objectif est la synthèse enzymatique de bibliothèques d'ADN aléatoires modifiés, ouvrant la voie à l'application de la méthode Mod-SELEX, avec une sélection d'aptamères fonctionnalisés au ruthénium pour des applications de thérapie photodynamique ciblée. Nous discutons également du principe de la modification post-SELEX d'un aptamère spécifique des récepteurs MUC1, surexprimés dans les cellules cancéreuses MCF7. Nous avons cherché à déterminer si la concentration locale de ruthénium pouvait amplifier l'efficacité de la thérapie photodynamique. Pour ce faire, nous avons lié chimiquement un ou plusieurs complexes polypyridyles de ruthénium à cet aptamère, cherchant à combiner l'activité sélective de l'aptamère avec l'efficacité photodynamique du ruthénium. En résumé, ce travail de thèse porte sur la synthèse d'oligonucléotides modifiés, en mettant en évidence le développement de triphosphates modifiés combinant des complexes polypyridyles de ruthénium et d'autres photosensibilisateurs pour une thérapie photodynamique plus efficace et plus ciblée.