| Resumé |
Le mélanome uvéal (UM) est la tumeur primaire oculaire la plus fréquente chez l'adulte. L'UM métastatique présente une faible survie globale. Le facteur d'épissage SF3B1 est muté dans 22% des cas d'UM. Les mutations des régulateurs d'épissage dans les tumeurs représente une source potentielle de néoantigènes partagés et spécifiques des tumeurs (TSA). Nous avons précédemment montré que les mutations de SF3B1 dans les UM génèrent des néoantigènes immunogènes. Nous avons analysé ici la réponse immunitaire locale et systémique contre les antigènes tumoraux (Ag) à différents stades de la maladie. Nous avons analysé les lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL) dans 20 tumeurs primaires de l'UM. Dans 9 tumeurs, > 50 % des cellules T CD8+ exprimaient à la fois CD39 et PD1, suggérant une réactivité antigénique. Parmi eux, 1 à 10% étaient spécifiques de l'A2-Melan-A. Ces résultats suggèrent une réponse immunitaire locale contre un antigène associé à la tumeur (TAA). En utilisant la coloration ex vivo des tétramères, nous avons ensuite caractérisé les cellules T circulantes spécifiques des néoAgs liés au SF3B1mut et du Melan-A. Chez les patients atteints de tumeurs SF3B1mut localisées, les cellules T CD8+ spécifiques des néoAgs (A2:14 et A2:37) étaient enrichies en cellules effectrices/mémoires dans le sang par rapport aux patients porteurs de tumeurs SF3B1wt. Chez 50 % des patients porteurs de tumeurs SF3B1mut, les cellules T CD8+ spécifiques de A2:Melan-A présentaient un phénotype mémoire. Cet enrichissement spécifique reflète probablement la reconnaissance de TSA et TAA aux premiers stades de la maladie. Chez les patients atteints de tumeurs SF3B1mut métastatiques, nous avons confirmé la présence de cellules mémoire parmi les cellules T CD8 spécifiques de la néo-Ag. En outre, les patients métastatiques atteints d'une tumeur SF3B1mut présentaient un niveau plus élevé de cellules T CD8+ mémoires spécifiques de Melan-A dans le sang périphérique par rapport aux patients porteurs de tumeurs SF3B1wt. Ainsi, les réponses immunitaires contre le TSA et le TAA étaient corrélées chez les patients porteurs de tumeurs métastatiques UM SF3B1mut, suggérant une réponse immunitaire anti-tumorale coordonnée. Afin de caractériser le répertoire et les propriétés fonctionnelles des cellules réactives à l'Ag tumoral, nous avons cloné des cellules T CD8+ spécifiques du néoAg et du Melan-A à partir de PBMCs de patients atteints de tumeurs métastatiques de l'UM SF3B1mut. L'analyse du répertoire des TCR a montré une utilisation conservée des TRAV entre les donneurs pour certains TSA. De plus, la mesure du K-off de liaison TCR : MHC-peptide dans les clones résultants a indiqué que des TCR de faible et de forte affinité étaient mobilisés pendant la réponse immunitaire contre les AgS TA et TS, ce qui plaide contre une forte délétion clonale. Enfin, nous avons analysé une cohorte de patients atteints de mélanome uvéal métastatique traités par des bloqueurs anti-PD1. Les patients présentant des tumeurs SF3B1 mutées ont présenté une meilleure survie globale par rapport aux tumeurs SF3B1 non mutées. Il reste à déterminer si ce résultat reflète une moindre agressivité intrinsèque des tumeurs SF3B1mut ou une meilleure sensibilité à l'immunothérapie. Dans l'ensemble, ces résultats suggèrent que le système immunitaire est conscient de la présence de cellules UM à un stade précoce, en particulier pour les tumeurs SF3B1mut. La présence d'une réponse immunitaire coordonnée spécifique de l'antigène tumoral chez les patients porteurs de tumeurs SF3B1mut fournit de nouvelles informations sur la réponse immunitaire au cours de l'histoire naturelle de l'UM et ouvre la voie à de nouveaux traitements immunologiques pour cette maladie. |