| Resumé |
La thérapie cellulaire dans l'artériopathie oblitérante des membres inférieurs (AOMI) est un domaine de recherche visant la régénération vasculaire notamment au stade d'ischémie critique où le membre inférieur est à risque d'amputation. Les succès mitigés des essais thérapeutiques réalisés peuvent provenir du produit de thérapie cellulaire utilisé, comme par exemple la moelle osseuse autologue supposée contenir les progéniteurs vasculaires. L'origine des Endothelial Colony-Forming Cells (ECFCs), le sous-type vasculogénique des cellules progénitrices endothéliales, reste encore inconnu. Dans un 1er article (1), nous avons rapporté que les very small embryonic-like stem cells (VSELs) présentes chez l'adulte sont capables d'auto-renouvèlement et de différenciation vers les 3 lignées germinales et seraient un bon candidat. L'équipe du Pr Smadja a démontré que les VSELs issues de moelle osseuse humaine pouvaient se différentier en cellules endothéliales et contribuer à la vasculogénèse. Dans un 2ème article en écriture j'ai participé à la caractérisation par cytométrie en flux des cellules immatures circulantes de patients porteurs d'un coeur artificiel CARMAT. L'existence d'une néo-endothélialisation au sein de ce coeur témoigne d'une colonisation par des progéniteurs cellulaires et nous avons démontré une mobilisation de cellules immatures circulantes dont des VSELs un mois après implantation. A l'aide du panel d'anticorps mis au point dans le travail précédent, afin de quantifier, isoler et expandre des VSELs circulantes chez des patients avec AOMI nous avons mis en place la collection biologique prospective monocentrique VESSELS (VEry Small embryonic like cellS Expandability in Lower limb arterial diSease), stratifiée sur les stades d'ischémie d'effort ou ischémie critique et associé ou non au diabète. Seuls 55 patients ont été inclus en lien avec les difficultés d'inclusion liée à l'épidémie COVID-19. Par ailleurs, les VSELs sont apparentées aux cellules germinales primordiales migratrices et prolifèrent ainsi sous l'action de gonadotrophines : l'hormone folliculo-stimulante (FSH) et l'hormone lutéinisante (LH). Le 3ème article soumis à Journal of Thrombosis and Haemostasis(2), vise à tester les propriétés angiogéniques des ECFCs issus de sang de cordon traités par FSH et LH. Nous avons pu montrer qu'elles augmentaient le potentiel angiogénique des ECFCs in vitro mais pas leur prolifération ni l'engagement en ECFCs des cellules mononuclées de sang de cordon. Par ailleurs, la génération de thrombine était accrue après culture par FSH et ces gonadotrophines étaient plus élevées chez les hommes avec AOMI comparés à leurs contrôles. Ces hormones pourraient ainsi jouer un rôle dans la physiopathologie de l'AOMI. Enfin dans un 4ème article en cours d'écriture, j'ai comparé les caractéristiques distinguant les hommes et les femmes hospitalisés pour AOMI. A la ménopause les gonadotrophines restent élevées en plateau et n'ont plus les variations liées aux cycles menstruels. Les femmes nécessitent une hospitalisation pour AOMI à un âge plus avancé que les hommes, et leur athérosclérose est plus diffuse. Nous allons ajouter l'analyse des profils hormonaux dans la collection biologique VESSELS afin de mieux comprendre l'implication des gonadotrophines dans l'AOMI. En perspective, VESSELS permettra d'appliquer les techniques de caractérisation des cellules immatures développées au cours de ma thèse, puis d'isoler et expandre les VSELs afin de pouvoir tester ces cellules comme produit de thérapie cellulaire. Références : 1. Detriche, G., Guerin, C. L., Gendron, N., Mirault, T. & Smadja, D. M. Do Endothelial Colony'forming Cells Come From Bone Marrow or Vessels/VSELs? Stem Cell Rev. Rep. (2021) doi:10.1007/s12015-021-10140-y. 2. Détriché, G. et al. Gonadotropins as new active partners in vascular diseases: insight from endothelial colony-forming cells angiogenic properties and thrombotic potential. J. Thromb. Haemost. submitted |