Role of non-vesicular secretion in neuronal development
Rôle des mécanismes non-vésiculaires de sécrétion impliqués dans la croissance neuritique
par Alessandra GALLO sous la direction de Thierry GALLI
Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie. Neurobiologie
ED 562 Bio Sorbonne Paris Cité

Soutenue le lundi 30 septembre 2019 à Université Paris Cité

Sujets
  • Lipides membranaires
  • Membrane cellulaire
  • Neurones
  • Neurosécrétion
  • Protéines SNARE

Les thèses de doctorat soutenues à Université Paris Cité sont déposées au format électronique

Consultation de la thèse sur d’autres sites :

TEL (Version intégrale de la thèse (pdf))

Description en anglais
Description en français
Mots clés
Sites de contact membranaires, Protéines de transfert de lipides
Resumé
La croissance des neurites au cours du développement neuronal nécessite une expansion de la membrane plasmique (MP) via l'insertion de nouveaux lipides et protéines. Cet événement se produit à la suite de la fusion des vésicules de sécrétion avec la MP. Cependant, plusieurs études ont montré que le transfert non-vésiculaire de lipides au niveau des sites de contact entre le réticulum endoplasmique (RE) et la MP joue aussi un rôle dans la croissance des cellules. Des membres de la famille de synaptotagmines étendues (E-Syts) ont été identifiés comme protéines de transfert des lipides dépendantes du Ca2+ au niveau des jonctions RE-MP.Nous avons découvert qu'un nouveau complexe SNARE aux sites de contact RE-MP, composé par Sec22b et Stx1, est impliqué dans la croissance des neurites bien qu'il soit incapable de favoriser la fusion membranaire. Cependant, la manière dont ce complexe participe à l'extension des neurites reste à élucider. Chez la levure, Sec22 interagit avec les protéines de transfert des lipides de la famille OSH, enrichis aux sites de contact RE-MP.Sur la base de ces observations, notre hypothèse est que le transfert non-vésiculaire de lipides induit par E-Syts au niveau des jonctions RE-MP contenant Sec22b pourrait contribuer à la croissance neuronale. L'objectif de ma thèse était d'explorer cette hypothèse. Nous montrons que Sec22b interagit avec E-Syt2 et Stx1 dans les cellules PC12 et avec E-Syt2, E-Syt3 et Stx3 dans les cellules HeLa. L'interaction Sec22b/E-Syt2 dépend du domaine Longin de Sec22b. La surexpression des E-Syts stabilise l'association Sec22b/Stx1, alors que l'inactivation des E-Syts provoque l'effet inverse. La surexpression de E-Syt2 de type sauvage, mais pas des mutants incapables de transférer les lipides ou non fixés au RE, augmentent la formation de filopodes axonaux et la ramification de neurites dans les neurones en développement. Cet effet est inhibé par une neurotoxine clostridiale clivant Stx1, par l'expression du domaine Sec22b Longin et par un mutant Sec22b ayant une extension entre les domaines SNARE et transmembranaire.En conclusion, mes résultats soutiennent l'idée que les sites de contact Sec22b/Stx1 contribuent à l'expansion de la MP via une interaction avec des protéines de transfert de phospholipides comme E-Syts.