Characterization of the role of lpaA on the cytoskeletal anchorage of Shigella flexneri
Caractérisation du rôle de la protéine IpaA sur l'ancrage cytosquelettique de Shigella flexneri
par Daniel Isui AGUILAR SALVADOR sous la direction de Guy TRAN VAN NHIEU
Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie. Microbiologie procaryote et eucaryote
ED 562 Bio Sorbonne Paris Cité

Soutenue le Thursday 07 November 2019 à Université de Paris (2019-....)

Sujets
  • génétique
  • métabolisme
  • Shigella flexneri
  • Systèmes de sécrétion de type III
  • Taline
  • Vinculine

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Mots clés
IpaA
Resumé
Shigella envahit les cellules de l'épithélium intestinal en injectant des protéines effectrices via un système de sécrétion de type III (T3SS). L'effecteur de type III IpaA se lie à la taline et à la vinculine par l'intermédiaire de trois sites de liaison à la vinculine (VBS), favorisant ainsi l'ancrage cytosquelettique ainsi que l'internalisation des bactéries. Contrairement à d'autres bactéries invasives, Shigella ne montre pas d'activité de liaison cellulaire constitutive mais déclenche une adhésion transitoire par l'activation de T3SS. IpaA VBS3 s'est avéré être structurellement analogue à l'hélice de la taline H5, qui, avec H1-H4, forme le faisceau de taline R1. L'analyse fonctionnelle identifiée IpaA VBS3 est nécessaire au recrutement de la taline dans les foyers d'entrée de Shigella et à la formation d'adhérences naissantes et de filopodes. IpaA VBS3 stimule également la capture filopodiale des bactéries et stabilise les adhérences cellulaires dans les cellules envahies. D'autre part, les modèles structurels des interactions IpaA VBS ¿ Vinculin indiquent un nouveau mode d'activation de la vinculine, impliquant des changements conformationnels dans le domaine de la tête de la vinculine, conduisant à la trimérisation et à la stabilisation des adhérences focales. IpaA a également été observé comme étant injecté par une bactérie "s'embrassant et courant", facilitant des événements supplémentaires de liaison bactérienne et d'invasion. Cet amorçage dépendant d'IpaA dépendait d'IpaA VBS3 mais pas d'IpaA VBS1-2. Une fois injecté, IpaA, forme des grappes apposées sur le côté apical de la cellule pour induire une grappe d'intégrines. Globalement, les résultats indiquent que l'IpaA provoque des modifications générales des propriétés adhésives des cellules et favorise un mécanisme coopératif d'invasion de Shigella.