| Mots clés |
Cep55, Ubiquitine, Cytocinèse, Corps intermédiaire, Syndrome MARCH, Cellules souches pluripotentes induites, Criblage phénotypique, Médecine de précision, Miniaturisation d'essai |
| Resumé |
CEP55 - Centrosomal Protein 55 kDa - est un actuateur moléculaire central de la division cytoplasmique terminale, surexprimé dans de nombreux cancers. Notre perspective liminaire structure-fonction de CEP55 révèle deux domaines de liaison à l'Ubiquitine analogues à ceux de NEMO, un faisceau torsadé d'hélices - NOA CEP55 - et un domaine structuré en doigt de zinc - UBZ CEP55 - avec différentes préférences de liaison aux chaînes d'Ubiquitine. Ces domaines contrôlent l'abscission cytokinétique mais affectent diversement les fonctions de CEP55 au corps intermédiaire, vers lequel le doigt de zinc sert de récepteur d'adressage nécessaire, suffisant et dépendant de l'Ubiquitine. Étonnamment, l'UBZ CEP55 correspond presque à la séquence commune minimale manquante chez les patients hydranencéphaliques affectés par le syndrome MARCH. Une anomalie cytocinétique plutôt que ciliopathique peut expliquer l'absence de cerveau car la protéine CEP55 tronquée pathologique n'est pas localisée au corps intermédiaire, alors que même la forme sauvage n'est pas retrouvée au centrosome. Les cellules souches pluripotentes induites à partir de cellules MARCH primaires de liquide amniotique peuvent aider à résoudre les mécanismes pathologiques. Par ailleurs, notre criblage phénotypique par siRNA, employant une détection automatique développée en interne de la cytocinèse, a révélé trois Ubiquitine ligases E3 et une déubiquitinase - LNX2, NEURL, RNF157 et UCHL1 - dont l'inactivation partielle affecte variablement l'abscission et le recrutement de CEP55, soulignant le lien à la signalisation par l'Ubiquitine ainsi que de possibles cibles thérapeutiques en médecine cancérologique de précision. Dans le contexte de cette dernière et pour permettre des criblages de cytocinèse à large échelle, nous avons initié le développement d'une micropuce de criblage phénotypique remplissable acoustiquement. |