Grossesse, Placenta, Premier trimestre, Homeostasie redox, NADPH oxydase, Nox, MAPK, P38, Prééclampsie

Le placenta est un organe transitoire permettant les échanges nutritionnel et gazeux entre la mère et le fœtus. Son unité structurale et fonctionnelle est la villosité choriale (VC), constituée en son centre d'un axe mésenchymateux bordé par une couche cellulaire de cytotrophoblastes villeux (CTV) fusionnant pour former la couche la plus externe : le syncytiotrophoblaste (ST), sécréteur d'hormones indispensables au maintien de la grossesse, notamment l'hCG. Au premier trimestre de la grossesse (T1), le placenta se développe dans un environnement pauvre en O2 dû à l'obstruction des artères utérines spiralées par des bouchons cytotrophoblastiques empêchant le sang maternel oxygéné de pénétrer dans la chambre intervilleuse (CIV). Dès 10 semaines d'aménorrhée (SA), ces bouchons se délitent, laissant entrer le flux sanguin dans la CIV au contact direct du placenta. La pO2 passe alors de 20 mmHg à 60 mmHg. En présence d'O2, la cellule produit des espèces réactives de l'oxygène (ERO) jouant le rôle de seconds messagers dans de multiples processus physiologiques (prolifération, différenciation, apoptose). Ils peuvent être cytotoxiques dans le cas du stress oxydant : la cellule possède un système de défense antioxydant permettant de maintenir le taux d'ERO intracellulaire à un niveau physiologique faible. L'équilibre des espèce pro- et anti-oxydantes est appelé homéostasie redox. Au T1, le placenta est soumis à une transition environnementale requérant l'adaptation de sa balance redox pour assurer le bon développement du placenta. Les objectifs de ce travail sont : (i) Déterminer la source principale d'anion superoxyde O2.- avant et après l'augmentation de la pO2 dans la CIV et étudier les défenses antioxydantes associées. (ii) Etudier l'impact de l'oxygéno-transition sur les voies redox-sensibles, notamment les MAPKs impliquées dans la prolifération et la différentiation trophoblastique. (iii) De déterminer au T1 l'influence de l'activité de la NADPH oxydase (Nox) placentaire sur la sécrétion du sFlt-1, facteur anti-angiogénique impliqué dans la physiopathologie de la prééclampsie (PE) afin de proposer de nouvelles réflexions concernant l'implication de la Nox dans la genèse de cette pathologie d'origine placentaire. Dans la VC (7-9 SA et 12-14 SA), la mesure de la production d'O2.- alliée à l'utilisation d'inhibiteurs spécifiques des différentes sources d'ERO montre que la Nox est la source principale d'O2.- au T1. Cette production est plus importante avant 10 SA et est associée à une modification de la localisation de la sous-unité organisatrice de Nox2, p47phox. Cette activation de la Nox placentaire est associée à une activation de la voie p38MAPK. p38 est localisée essentiellement dans le CTV au T1. L'expression génique et protéique des différentes isoformes de Nox révèle la présence de Nox2, Nox4 et Nox5 dans le trophoblaste au T1. Nox1 est cependant indétectable. L'activité des enzymes antioxydantes (SOD1, catalase, Gpx1) est augmentée à 12-14 SA, témoin de l'adaptation du système antioxydant à l'oxygéno-transition. L'exposition de VC à 7-9 SA au TGF-B1, activateur de Nox4 et de p38MAPK, associée à un inhibiteur de la voie p38 (SB203580), montre que l'activation de la voie p38 par le TGF-B1 entraine une augmentation de la sécrétion de sFlt-1. Cet effet est aboli par l'utilisation de SB203580. Dans notre modèle, l'exposition au TGF-B1 n'influence pas l'activation de la Nox. Cependant, l'utilisation d'un inhibiteur de Nox (DPI) permet de diminuer la sécrétion de sFlt-1. Ce travail a permis de montrer que la Nox est la source principale d'O2.- dans le placenta au premier trimestre en association avec l'activation de la voie p38MAPK. Nos résultats montrent que la sécrétion du sFlt-1 par la VC au premier trimestre est dépendante de la voie p38MAPK. Ce travail permettra une meilleure compréhension de l'implication des sources d'ERO dans le développement placentaire précoce et leur(s) rôle(s) dans la pathogenèse de la PE.