Vésicules extracellulaires, Allogreffe, Immunité innée, P2X7R, Cross-dressing, Souris transgénique, Biomarqueur

Les vésicules extracellulaires (EV) représentent une population très hétérogène de vésicules, incluant les exosomes et les microvésicules. Les EV sont produits par tous les organismes et jouent un rôle important dans la communication intracellulaire. Les EV libérés par les cellules des organes greffés jouent un rôle important dans l'initiation de la réponse T allo-immune conduisant au rejet. Dans la voie semi-directe, les cellules présentatrices d'antigène (APC) du receveur capturent ces vésicules et présentent ensuite les molécules du CMH du donneur à leur surface (MHC cross-dressing). Nous avons précédemment démontré que l'activation des cellules T alloréactives par ces APC « cross-dressed » joue un rôle clé dans l'induction de la réponse T allo-immune conduisant au rejet de l'allogreffe. Étant donné que le rôle de l'immunité innée sur la formation des EV reste mal compris, dans la première partie de ma thèse, nous avons étudié ce rôle déclenché par la signalisation P2X7R médiée par l'ATP extracellulaire sur la production des EV par des macrophages activés in vitro et par des cellules du donneur chez des souris allogreffées. Nos résultats démontrent que la signalisation P2X7R contrôle la libération des EV par les macrophages activés in vitro via les TOLL-like recepteurs (TLRs) et la sécrétion des EV dérivés du donneur chez les souris transplantées avec un coeur ou une peau allogénique. Ces résultats révèlent un nouvel aspect du rôle de l'immunité innée en transplantation. Les cellules saines et pathologiques libèrent en permanence des EV de tailles et de contenus différents, générés via diverses voies de biogenèse intracellulaire. L'identification d'EV spécifiques d'un tissu, ainsi que leur contenu peut permettre de monitorer spécifiquement l'état cellulaire et être utilisés comme biomarqueurs précoces de maladies. Afin de mieux comprendre cette hétérogénéité complexe des EV, dans la deuxième partie de ma thèse, nous avons utilisé des nouveaux outils d'imagerie (nano-flow cytometry et quantitative single molecule localization microscopy) sur un modèle de souris transgénique (exoMap) pour caractériser des populations d'EV spécifiques de cellules immunitaires et caractériser l'hétérogénéité des EV au niveau d'un seul EV. Nos résultats valident pour la première fois une nouvelle approche méthodologique pour visualiser des sous-populations d'EV spécifiques de tissus, les caractériser au niveau de leur contenu ainsi que les imager pour mieux comprendre comment ils changent avec le stress. De plus, ce modèle de souris permet d'identifier les cellules réceptrices d'EV grâce à un gène rapporteur fluorescent, ce qui peut faciliter l'étude de l'interaction entre les cellules immunitaires et l'organe transplanté dans le futur. Cette plateforme offre de nouvelles perspectives pour la découverte d'EV spécifiques de tissus, avec des applications cliniques potentielles compte tenu de l'utilisation prometteuse des EV collectés à partir de liquides biologiques comme outils de diagnostic.