Immunorégulation, Thérapie cellulaire, Progéniteurs hématopoïétiques, Maladie du greffon contre l'hôte, Sclérose en plaques

A partir des cellules souches et progéniteurs hématopoïétiques de la moelle osseuse se reconstituent par différenciation l'ensemble des cellules du système immunitaire. Mais les progéniteurs hématopoïétiques peuvent également répondre à diverses stimulations immunitaires innées, permettant la constitution d'une mémoire immunitaire entrainée, favorisant une réponse accrue lors d'une stimulation réitérée. Nous avons entrepris de rechercher si, à l'inverse, ces stimulations pourraient conférer aux progéniteurs hématopoïétiques la capacité de réguler la réponse immune. Notre laboratoire avait démontré qu'un transfert adoptif de progéniteurs B activés via leur TLR-9 par le CpG (CpG-proBs), supprimait l'auto-inflammation dans des modèles murins de diabète du type 1 (TD1) et de sclérose en plaques, l'encéphalomyélite auto-immune expérimentale (EAE). Nous mettons maintenant en évidence le potentiel régulateur des CpG-proBs dans le contexte de la greffe de moelle osseuse allogénique. Nous montrons que le transfert adoptif de seulement 750.000 CpG-proBs mais non de proBs quiescents, après une greffe de moelle allogénique protège les souris contre la maladie chronique du greffon contre l'hôte (GVHD) dans un modèle sclérodermique et réduit tout particulièrement le développement de la fibrose cutanée. Les progéniteurs migrent vers la peau et les ganglions où ils se différentient majoritairement en lymphocytes B folliculaires, et limitent la réaction auto-immune et allogénique dans un mécanisme impliquant la réduction de la réponse Th2 dans les ganglions ainsi qu'une accumulation de Treg CD4 Foxp3+, de CD8 IL-10+ et de Breg (B10) dans la peau des souris. Cet effet régulateur des CpG-proBs s'avère dépendre de leur capacité à produire de l'IFNγ. Dans un deuxième chapitre, nous étudions les bases moléculaires et cellulaires de la protection envers l'EAE exercée par des précurseurs de cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC) uniquement lorsqu'ils sont activés via leur TLR-9 par le CpG. Nous montrons que l'activation par le CpG accroit l'expression du CD29 sur les CpG-pre-pDCs, et augmente leur migration au site de l'inflammation dans l'EAE, le système nerveux central (SNC), par rapport aux pre-pDCs non activés (PBS-pre-pDCs). Parvenus au SNC, les CpG-pre-pDCs produisent du TGF-ß; et de l'IL-27 de façon séquentielle. Ces cytokines jouent un rôle protecteur respectivement précoce et tardif. Une accumulation de pDCs producteurs de TGF-ß, de cellules dendritiques conventionnelles, et de cellules B10 est observée sélectivement dans le SNC des receveurs de CpG-pre-pDCs. Ainsi, l'activation du TLR-9 par le CpG conditionne les propriétés immunorégulatrices des précurseurs de pDCs et de lymphocytes B. Enfin, nous avons aussi démontré que le transfert adoptif de progéniteurs multipotents (MPP) mobilisés par le G-CSF, protège contre l'EAE ainsi que contre la GVHD aigue, ce en augmentant l'expansion des Treg directement in vivo, limitant ainsi la prolifération des T CD4+ pathogéniques. Pour conclure, nous avons mis en évidence que diverses stimulations de l'hématopoïèse confèrent à plusieurs populations de progéniteurs hématopoïétiques des propriétés immunorégulatrices. Ces progéniteurs hématopoïétiques activés constituent de nouveaux outils de thérapie cellulaire des maladies auto-immunes et allogéniques.